Diagnostika parodontálních patogenů

Vážená paní doktorko, vážený pane doktore,

Centrum mikrobiologie, parazitologie a imunologie Zdravotního ústavu (CMPI ZÚ) Ostrava ve své nabídce vyšetření už léta nabízí také průkaz mikroorganizmů metodou polymerázové řetězové reakce (PCR). V nejbližší době připravujeme rozšíření naší nabídky o diagnostiku parodontálních patogenů.

V současnosti je celosvětově přijata skutečnost, že anaerobní mikroorganizmy jsou rozhodujícím etiologickým činitelem při vzniku a rozvoji zánětlivých onemocnění parodontu. Součástí diagnostiky těchto onemocnění je proto také mikrobiologický průkaz parodontálních patogenů. Jejich detekce se nejčastěji provádí s využitím PCR metod, jejichž výhodou je:

1. Rychlost – provedení testu trvá cca 6-7 hodin
2. Kontaminace vzorků doprovodnou mikroflórou nemá vliv na kvalitu výsledků
3. Nenáročné podmínky odběru a transportu, protože test nevyžaduje živé mikroorganizmy

PCR test je významnou diagnostickou pomůckou pro specifickou a citlivou detekci   patogenních bakteriálních markerů parodontu. Poskytuje důležité informace pro rozhodování o efektivní formě léčby. V průběhu ošetřování parodontu může být test použit na dokumentaci úspěšnosti léčby a na rozhodnutí zda léčbu ukončit. Test může zjednodušit včasné rozpoznání relapsů a zjišťovat případná ložiska. Před korekcí protézou poskytne test informaci o riziku potíží s implantáty. Konečně, výsledky mohou zvýšit pacientovu motivaci ke zlepšení ústní hygieny.  

U těžkých forem parodontitid je součástí výchozí terapeutické strategie adjuvantní antibiotická léčba, která se řídí právě výsledky molekulárně-biologických testů. DNA testy sice nezjišťují citlivost sledovaných patogenů k antibiotikům, nicméně i v této oblasti májí vysokou klinickou, empiricky relevantní hodnotu pro cílenou antibiotickou léčbu.

Mikrobiálně způsobené zánětlivé onemocnění parodontu je  dobře prozkoumáno. Jsou zde ale další faktory, které mají vliv na zánět a imunitní odpověď lokální i systémovou. Efektivita imunitní odpovědi jednotlivce může mít vliv na rozsah destrukce parodontu. Vnímavost na mikrobiální infekce může být tudíž ovlivněna částečně genotypem hostitele. Pro-zánětlivý cytokin interleukin-1 (IL-1) je klíčovým regulátorem odpovědi hostitele na mikrobiální infekci a hlavní modulátor resorbce kostí. Uvádí se, že variace ve IL-1 shluku genů, které vedou ke zvýšené produkci IL-1, jsou spojeny se zvýšenou vnímavostí na závažné parodontitidy u dospělých. IL-1 představují dvě molekuly, IL-1a a IL-1b, kódované geny IL-1A a IL-1B. V souvislosti s parodontitidou jsou středem zájmu dva genotypy IL-1A alela2 a IL-1B alela2. Složený genotyp IL-1A alela 2 a IL-1B alela 2 (jak heterozygotní tak homozygotní) byl shledán rizikovým pro onemocnění parodontu.

Test, který připravuje oddělení molekulární genetiky CMPI ZÚ ve spolupráci s oddělením bakteriologie umožňuje průkaz těchto patogenů: Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus (nová nomenklatura: Tannerella forsythensis) a Treponema denticola a rizikových genetických faktorů  IL-1A  alela2 a IL-1B  alela2.

Všeobecně používanou metodou odběru pro detekci parodontálních patogenů DNA testy je zavádění papírových čepů (endodontické čepy ISO 40) do sulku, respektive parodontálního chobotu. Cílovým materiálem odběru je DNA bakteriální flory subgingiválního plaku v papírem nasáté tekutině. Supragingivální plak je nutno před zavedením papírového čepu odstraňovat! Je možno provést dva způsoby odběru:

Subgingivální odběr pro cílené vyšetření z jednoho místa
Tento způsob odběru zajišťuje informace o výskytu a koncentraci patogenů v jednom zvoleném místě parodontu. Papírový čep po vytažení z chobotu je pak vložen do samostatné zkumavky.

Subgingivální „multi-site“ odběr
2-5 papírových čepů se zavádí do chobotů u více zubů (skupinově v jednom i více kvadrantech). Ihned po vytažení z chobotu jsou všechny ukládány do jedné společné transportní zkumavky. Všech 2-5 čepů se v laboratoři zpracovává jako jeden vzorek.

Odebrané vzorky je možno do laboratoře zaslat poštou.

Provedení vyšetření je možno financovat ze zdravotního pojištění jako výkon 82041 (Průkaz DNA mikroorganizmu v klinickém materiálu hybridizační sondou s amplifikací) + 94189 (Hybridizace se značenou sondou), celkem 1694 bodů, ovšem s omezením max. 4x ročně. Další vyšetření je možno provést pouze na náklady pacienta, přičemž jeden bod je fakturován jako 1 Kč (tedy1694,-Kč).

Naším cílem je poskytnou kvalitní laboratorní služby tak, aby Vaše a pacientova péče o zdraví mohla přinést maximální výsledky. Dobrým základem pro takto vytýčený cíl je vzájemná spolupráce. Budeme proto vděčni za vaši reakci, zda máte o tuto diagnostiku zájem. Rádi také odpovíme na Vaše další případné dotazy či připomínky, které je možno psát na email: jakub.mrazek@zu.cz .

Děkujeme za návštěvu. Budeme rádi, když vyplníte dotazník.

Mgr.Jakub Mrázek
odd.molekulární genetiky ZÚ Ostrava

V textu byly použity informace z http://www.pulib.sk/elpub/FZ/Tapajova1/index.htm